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細胞培養(yǎng)時,鏡下有小黑點,怎么解決?

更新時間:2020-11-12  |  點擊率:998

有些實驗人員報告,細胞培養(yǎng)時在鏡下發(fā)現(xiàn)有小黑點。

 

這是有污染嗎?應(yīng)如何處理?

 

一旦您在細胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成,可采取下列步驟:

 

首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,

 

然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細胞生長的狀態(tài),黑點是否游動。

如果細胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細菌污染、支原體污染等。

 

如果在鏡下觀察細胞,生長狀態(tài)良好,與黑點出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):

 

(1)細胞生長過老,破碎的細胞殘骸;

 

(2)血清質(zhì)量不好,反復(fù)凍融的結(jié)果;

 

(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細胞生長;

 

(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格??蓱?yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點;

 

(5)培養(yǎng)原代細胞中出現(xiàn)小黑點,可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。

 

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